Sigma：過氧化物酶 來源于辣根

屬性：

Type：Type VI-A

Quality Segment：300

Form：essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity：≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)

mol wt：~44 kDa

Solubility：0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble

application(s)：diagnostic assay manufacturing

storage temp.：2-8°C

說明：

General description：

辣根過氧化物酶是從辣根（Amoracia rusticana）中分離出來的，屬于過氧化物酶的鐵原卟啉基團。HRP是含有四個二硫鍵的單鏈多肽。它是一種含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺組成，具體取決于特定同工酶。其分子量（約44 kDa）包括多肽鏈（33,890道爾頓）、氯化血紅素加Ca2+ （約700道爾頓）和碳水化合物（約9,400道爾頓）。至少存在7種HRP同工酶。 辣根過氧化物酶同工酶的等電點范圍為3.0-9.0。

Application：

辣根過氧化物酶（HRP）分離自辣根中（Amoracia rusticana）。 它可用于生物化學應用，如蛋白質印跡、ELISA和免疫組織化學。 辣根過氧化物酶可用于擴增弱信號并增加靶分子（例如蛋白質）的可檢測性。 產品P6782是VI-A型，本質上是一種無鹽凍干粉。 它被用于定量膽固醇和膽固醇酯，并用于研究水凝膠和硅水凝膠隱形眼鏡的體外脂質沉積。

Sigma的酶已被用于開發快速、靈敏且具有長期穩定性的半乳糖氧化酶-過氧化物酶生物傳感器，以便檢測半乳糖。它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基聯苯胺（TMB）的培養基（MRS瓊脂板）的組分，用于乳酸菌的生長。TMB是過氧化物酶的顯色底物。過氧化物酶將乳酸菌產生的H2O2 催化分解為O2，并且TMB在O2存在下將菌落染成藍色。因此，在含5% CO2 的空氣環境下孵育48小時后，MRS瓊脂上產生H2O2 的菌落呈深藍色。不產生H2O2 的菌落仍為無色。它已被用于研究聚乙烯醇對辣根過氧化物酶的穩定作用。它還被用于測定溶液中的葡萄糖 和過氧化物 。

Biochem/physiol Actions：

HRP容易與過 yang 化氫（H2O2）結合，生成的[HRP-H2O2]配合物可以氧化多種氫供體。該酶的最適pH為6.0-6.5，在5.0-9.0的pH范圍內zui穩定。HRP可以通過幾種不同的方法與抗體結合，包括使用戊二醛、高碘酸鹽氧化、二硫鍵以及氨基和巰基定向交聯劑。它比酶標記物β-半乳糖苷酶和堿性磷酸酶更小、更穩定。因此，它是zu i 理想的標記物。同時，其糖基化會產生較低的非特異性結合。已有研究發現疊dan化鈉、氰 hua物、L-胱氨酸、重鉻酸鹽、亞乙基硫脲、羥胺、硫化物、釩酸鹽、對氨基苯甲酸以及 Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+和Pb2+離子可抑制該酶活性。

辣根過氧化物酶與底物一起孵育時，產生一種有色、熒光或發光的標記分子衍生物，以便可以定量。 辣根過氧化物酶已被證明能抑制cydAB突變,使其突變水平稍微降低。

Packaging：

包裝單位為mg固體

Preparation Note：

本品以1 mg/mL的濃度溶于0.1 M磷酸鹽緩沖液（pH 6.0）中，可在室溫下保持活性至少兩周。該溶液在5次凍融循環后仍保留活性。

Analysis Note：

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去離子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血紅素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值較高的制劑也可能具有較低的酶活性。

本品使用ABTS測定，以便與其他供應商的單位進行比較：每mg固體約1,000單位

Other Notes：

一個ABTS單元將在25°C、pH 5.0條件下每分鐘氧化1 μM的ABTS

一個連苯三酚單元將在20℃、pH 6.0條件下，在20秒內從連苯三酚形成1.0mg的紅棓酚。

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